E班教师：

杀老师

本故事的主角。椚丘中学3年E班的导师。自称是将月球炸毁七成的罪魁祸首，并扬言要在来年三月炸毁地球。尽管世界各国的政府都无法捉拿或杀死他，但他主动提出交换条件，要求担任3年E班的导师。为此，日本政府将暗杀任务分派给3年E班的学生。于是他向学生传授知识，同时与学生兵刃相向

没有名字，茅野便为他取了“杀老师”这一昵称，乃是将日文的“杀不死”（殺せない）和“教师”（先生）合写而成

像一只黄色的章鱼，有大头和多根触手，皮肤的颜色会随心情变化。可以20马赫速度移动，这让他能在短时间内穿梭于世界各地，并成为难以捉拿的目标。十分博学，几乎可以一个人教授所有科目。但随着故事进展，学生也渐渐发现他的弱点。

乌间惟臣（死脑筋/ 掘雷锤）

日本防卫省官员，前空降团精锐部队成员，电影中阶级为上校。初次登场时向E班宣布日本政府与杀老师的交易，并赋予他们暗杀杀老师的任务。

担任E班的名义上的班主任和体育教师，传授学生暗杀技巧并监视任务进度。尽管心地善良，但处事严格、不苟言笑，刻意与学生保持距离以保持自己的专业态度。非常保护和爱惜三年E班的学生，对浅野学峰的教育理念不表赞同，渐渐认同杀老师的教学方针。为了避免学生们被其他暗杀行动波及，在暗杀杀老师的条款中加入如果伤到学生则赏金作废的内容。

在军队中的名声显赫，打斗技巧高超，战术运用娴熟，战力可以说是本作无触手里的人类天花版。被伊莉娜·耶拉维琪和仓桥阳菜乃暗恋。与伊莉娜日久生情，在结局时结婚，并成为日本情报单位的高级干部。

伊莉娜·耶拉维琪（碧池老师）

塞尔维亚口音的性感女杀手，20岁。精通十种外语、交涉话术和色诱技巧。受雇杀死杀老师，失败后成为E班的外语教师。由於姓氏中“vich”（ヴィッチ）的发音近似于“Bitch”（ビッチ，荡妇），因此被学生取了“Bitch老师”的外号。负责教导学生外语和接待技巧，并以深吻惩罚在课堂上答不出问题的学生。

年幼时村庄被军队洗礼，全家都被杀光，为了保命而杀掉欲杀害自己的士兵。被罗夫洛发现，学习各种暗杀技巧。除了色诱和暗杀之外，也是钢琴高手。比起教导暗杀技巧，她更常以其它方式协助E班，曾色诱敌方协助学生潜入敌营，并在学生被囚禁时为她们暗中送上武器。

在E班任职期间逐渐喜欢上乌间，但因为乌间木头般的反应，投靠死神2代。死神2代被打倒后被E班众人原谅，再次回到E班，作风大有改变。最终与乌间结婚并加入防卫省，成为日本政府旗下的间谍

雪村亚久里

前E班导师，他是茅野枫的姐姐、柳泽夸太郎的未婚妻。参与柳泽的研究，并在杀老师还是人类时与他相遇，负责监控其身体状况，并这段期间培养了感情。当杀老师逃脱时亚久里试图让他冷静下来，但却意外地被原本用来对付杀老师的武器所杀。

死前将自己的学生托付给杀老师，而杀老师也答应了她。这个景象被茅野枫目击，使她产生误会以为杀老师是杀了亚久里的人。

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