暗杀者 ：
白／柳泽夸太郎
全身垄罩在抗杀老师物质所制成的白袍内的神秘科学家。初登场时自称“白”，糸成的监护人，将触手安装在糸成头上以对抗杀老师
本名为“柳泽夸太郎”，是研究反物质的权威，也是雪村亚久里的未婚夫。对她并没有感情，只是颐气指使和虐待她。是对杀老师进行实验的主导者，在他的实验付之一炬后，收养了糸成，但又在他失败后将之抛弃。后与第二代死神接触，两人都安装了触手，在最后大战中还是被杀老师击败，半身不遂，以半植物人的形式度过余生。
红眼
以狙击枪作为武器的杀手，企图在E班于京都毕业旅行时狙击杀老师，但在经过多次失败后放弃了，后与杀老师共进一顿火锅。
椚丘学园祭时来学校探访大伙，还顺便带来了刚射下来的野味。
罗夫洛·布洛夫斯基
俄罗斯杀手中介商，伊莉娜的师傅。他初次来到3年E班是为了带走伊莉娜，因为他认为伊莉娜做为杀手在那里已经没用，但伊莉娜证明了自己的能力。
再度登场时作为乌间的助手协助E班的训练，发现了渚的杀手才能，并将一项绝招传授给他。
鹰冈明
防卫省官员，乌间老师在军队里的同僚，非常嫉妒乌间的表现。他被安排到E班担任新的体育教师，教学理念为“糖和鞭子”。与学生们以家人相称，却以父亲自居而肆意精神和肉体上虐待学生。
为了击溃全班士气以及对抗乌间，让其选中一名学生与之以真刀对抗。乌间结果选了渚，而渚也很好地完成了任务。浅野学峰见其教育能力不足，直接将他辞退，鹰冈之后便从军里失踪。
在E班前往冲绳进行校外教学时再度出现，雇用了三个杀手让E班一半的学生中毒。乌间率领着剩下的学生在接连打败他雇佣的杀手后，以解药为要胁，要求渚与他再次正面对决。这次还是由渚胜出。最后，鹰冈被军队给逮捕。
SMOG
以毒气作为武器的杀手，也懂得自己开发新型病毒。被鹰冈雇用，被不破优月识破身份后，被乌间老师击倒。
GRIP
徒手为战斗风格的杀手。被鹰冈雇用，和赤羽业对决时使用了SMOG的毒气罐，却被对此早有预谋的业以相同手法反将一军而败北。
GASTRO
以手枪为武器的杀手，经常以手枪沾酱进食，口头禅是“枪好好吃”，曾经当过佣兵，能凭呼吸知道敌人位置。被鹰冈雇用，他被E班的团体战术耍得团团转，最后由千叶龙之介和速水澟香联手击败。
第二代死神
世界最强的杀手，他透过改造身体让自己变得更强，例如在食指植入小口径的枪。
初登场时是个平凡的卖花店长，替被E班弄伤了的院长叫救护车。后趁其心理波动时绑架伊莉娜并将她洗脑，后被赶来营救E班的乌间击倒。
后被揭露为第二代死神，是人类时期的杀老师(第一代死神)的学生。出身于富裕家庭，父亲是一个在某日即使突然暴毙也不会觉得奇怪的恶人。当目睹杀老师杀死父亲的过程后，为对方神乎其技的暗杀技巧着迷，事后便拜杀老师为师。
向往成为像杀老师一样的杀手，但因为杀老师只是教,而没有真正关注过他，迟迟得不到恩师的认同，最后背叛了杀老师并夺去其死神的头衔。之后与柳泽合作并被植入触手细胞，除了能以杀老师两倍的速度40马赫移动，还有大量触手作武器。最终仍然不敌杀老师，被其以特殊材质的刀刺中，灰飞烟灭而亡。杀老师自责一直对他没有尽教师的责任。